不同微波功率、時間對沙棘果粉菌落總數(shù)、霉菌含量、色差的影響（二）
1.3.4 微生物和理化指標測定
1.3.4.1 菌落總數(shù)測定
具體實驗流程參照GB 4789.2進行樣品前處理：無菌稱取25 g沙棘果粉，與225 mL無菌生理鹽水均質(zhì)，制備成1:10的樣品勻液，并據(jù)此進行10倍系列稀釋。隨后，選取適宜濃度的稀釋液，不經(jīng)培養(yǎng)，直接吸取一定體積（如10 μL）注入μCount3D專用計數(shù)板，由儀器自動完成進樣、成像、計數(shù)及數(shù)據(jù)分析過程，最終直接輸出樣品稀釋液的細胞濃度。結(jié)果經(jīng)稀釋倍數(shù)換算后，以細胞數(shù)每克（cells/g）報告。
1.3.4.2 霉菌測定
按照GB4789.15—2016《食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗霉菌和酵母計數(shù)》中的方法測定沙棘果粉的霉菌數(shù)量。
1.3.4.3 色差測定
參照Wojdylo等的方法并稍作修改，以儀器白板為標準，每個樣品平行測定3次，并記錄沙棘果粉的L值（亮度）、a值（紅綠度）、b*值（黃藍度），同時對3種不同干燥方式的總色差值ΔE進行評價。ΔE的計算公式如下：
式中：ΔE為總色差值；L0、a0、b0為沙棘果粉微波殺菌前的色差；L、a、b為沙棘果粉微波殺菌后的色差。
1.3.4.4 水分含量測定
水分含量使用鹵素水分測定儀在105°C下進行測定。
1.3.4.5 可溶性糖含量、可溶性蛋白質(zhì)含量、總酸含量、vc含量測定
可溶性糖含量、可溶性蛋白質(zhì)含量、總酸含量、vc含量的測定均參考曹建康等的方法，分別采用苯酚-硫酸法、考馬斯亮藍染色法、氫氧化鈉滴定法（折算系數(shù)為蘋果酸0.067）、2，6-二氯酚靛酚滴定法進行測定。
1.3.4.6 總黃酮含量測定
參考李娜等關(guān)于黃酮含量的測定方法，以蘆丁作為標準品，建立標準曲線：y=0.1066x+0.0053，R2=0.999，測定沙棘果粉的總黃酮含量。
1.3.4.7 總酚含量測定
參考李巨秀等關(guān)于總多酚含量的測定方法，以沒食子酸作為標準品，建立標準曲線：y=0.199 2x-0.1437，R2=0.9991，測定沙棘果粉的總酚含量。
1.3.4.8 溶解性測定
參照連雅麗的方法并稍作修改。精準稱取沙棘果粉1～2g，記為m1，倒入100mL60°C蒸餾水，并在60°C恒溫水浴鍋中加熱攪拌5min，在3000r/min條件下離心10min，取上清液在105°C烘箱內(nèi)干燥至恒重，殘留物質(zhì)量記為m2，利用公式（2）計算沙棘果粉的溶解性，每個樣品重復(fù)3次。
1.4 數(shù)據(jù)處理
每組試驗重復(fù)3次，結(jié)果以平均值士標準差的形式表示，采用Excel軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，采用Origin2021軟件繪圖，采用Design-Expert8.0.6.1進行響應(yīng)面分析，采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進行差異顯著性分析。
2 結(jié)果與分析
2.1 單因素試驗結(jié)果
2.1.1 不同微波時間對沙棘果粉菌落總數(shù)和色差的影響微波時間對沙棘果粉菌落總數(shù)的影響見圖1。
圖1 微波時間對沙棘果粉菌落總數(shù)的影響注：不同小寫字母表示差異顯著（P<0.05，下圖同。
由圖1可知，隨著微波時間的延長，沙棘果粉的菌落總數(shù)呈顯著下降趨勢（P<0.05），微波時間越長，受微波非熱效應(yīng)的影響，微生物細胞吸收微波能越多，進而改變細胞膜的通透性，抑制微生物的生長，使沙棘果粉的菌落總數(shù)呈下降趨勢。李科靜等的研究表明微波殺菌對減少黃曲霉孢子對數(shù)周期有顯著性影響，且微波時間越長，減少黃曲霉孢子對數(shù)周期越大，與本試驗的研究結(jié)果相似。因此，選擇微波時間90s作為響應(yīng)面中心值。
微波時間對沙棘果粉色差的影響見圖2。
圖2 微波時間對沙棘果粉色差的影響
隨著微波時間的延長，沙棘果粉的色差發(fā)生改變。由圖2中A可知，隨著微波時間的延長，沙棘果粉的L值呈上升趨勢，說明在微波30～150 s范圍內(nèi)可以提升沙棘果粉的亮度。由圖2中B可知，隨著微波時間的延長，沙棘果粉的a值呈先平緩后上升的趨勢，在0～90 s時，a值無顯著性變化（P>0.05），這可能是因為微波時間相對較短，對沙棘果粉a值的影響較小；沙棘果粉的a值在90～150 s時顯著增大（P<0.05），可能是因為隨著微波時間的延長，沙棘果粉發(fā)生褐變。由圖2中C可知，隨著微波時間的延長，沙棘果粉的b值呈下降趨勢，這可能是因為隨著微波時間的延長，沙棘果粉發(fā)生褐變。當微波時間為0，30，60，90，120，150s時，ΔE分別為0，1.21，1.76，1.89，2.18，2.49。
綜合沙棘果粉菌落總數(shù)和L值、a值、b*值、ΔE值，選擇微波時間30，90，150s進行后續(xù)響應(yīng)面試驗。
2.1.2 不同微波功率對沙棘果粉菌落總數(shù)和色差的影響
在物料量為15g、微波時間為120s的條件下，考察微波功率對沙棘果粉菌落總數(shù)和色差的影響，結(jié)果見圖3和圖4。
圖3 微波功率對沙棘果粉菌落總數(shù)的影響
由圖3可知，隨著微波功率的增加，沙棘果粉的菌落總數(shù)呈顯著下降趨勢（P<0.05），當微波功率為700W時，菌落總數(shù)最小，微波功率越大，殺菌效果越明顯。但微波功率為700W和560W時，菌落總數(shù)差異不明顯。蘇東民等研究發(fā)現(xiàn)小麥粉中芽孢桿菌隨著微波功率的增加快速完成萌發(fā)并失去抗性，從而滅菌效率大幅提升，與本試驗結(jié)果相似。因此，選擇微波功率560W作為響應(yīng)面中心值。
圖4 微波功率對沙棘果粉色差的影響
由圖4可知，隨著微波功率的增加，沙棘果粉的L值、a值均呈上升趨勢，b值呈下降趨勢，L值、a值、b值均有顯著性變化（P<0.05），這可能是因為隨著微波功率的增大，沙棘果粉發(fā)生褐變。微波功率為560W時的L值與420W和700W時無顯著性差異（P>0.05），560W時的b值與420W時有顯著性差異（P<0.05），與700W時無顯著性差異（P>0.05），560W時的a*值與420W和700W時有顯著性差異（P<0.05）。因此，選擇微波功率560W作為響應(yīng)面中心值。當微波功率為0，140，280，420，560，700W時，ΔE分別為0，0.69，1.92，2.93，3.89，4.85。
綜合沙棘果粉的菌落總數(shù)和L值、a值、b*值、ΔE值，選擇微波功率420，560，700W進行后續(xù)響應(yīng)面試驗。
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