丹毒敗血癥:豬紅斑丹毒絲菌形態、生化特征、鑒定及藥敏試驗——摘要、材料與方法
摘要
目的分析樂東黎族自治縣人民醫院收治的2例類丹毒敗血癥患者的臨床及微生物特征，為類丹毒診斷和治療提供參考依據。方法回顧性分析樂東黎族自治縣人民醫院2023年12月—2024年1月收治的2例經血培養確診為類丹毒敗血癥患者的臨床特征和治療情況，使用全自動血培養系統和固體培養基培養病原菌，基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜法和16s rRNA對培養出的細菌鑒定，微量肉湯稀釋法檢測病原菌對抗菌藥物的敏感性。結果2例患者在冬季發病，均有接觸豬或魚類的外傷感染史，有高熱、畏寒、胸悶、氣短癥狀，門診擬“發熱待查”入院。實驗室檢查結果提示炎癥指標異常增高，血和傷口分泌物標本有菌生長。血培養報陽后涂片可見革蘭陽性桿菌，呈長絲狀或短鏈排列。
將菌株接種于哥倫比亞血瓊脂平板，置于35℃恒溫培養箱中孵育。24 h后觀察可見針尖大小的初始菌落形成，繼續培養至48 h，菌落逐漸增大并呈現典型的圓形、濕潤、透明且凸起形態，邊沿整齊，表面呈灰白色，在菌落周圍可清晰觀察到狹窄的溶血環，菌落涂片革蘭染色陰性，分離菌經質譜和16s rDNA測序鑒定為紅斑丹毒絲菌；2個分離株對青霉素、氨芐西林、頭孢曲松、頭孢吡肟、美羅培南、紅霉素、克拉霉素和左氧氟沙星均敏感。病例1有惡性腫瘤基礎病，就診時周圍組織感染已較嚴重，使用阿莫西林克拉維酸鉀3 d后治療失敗；病例2根據藥敏結果接受氨芐西林治療8 d后取得良好的效果。結論類丹毒臨床特征不典型，易被誤診漏診，對于從事豬或魚類相關職業人群，外傷后有高熱者，應及時采集相應標本進行病原學檢測，根據藥敏報告合理使用抗菌藥物，改善預后。
類丹毒是由紅斑丹毒絲菌（Erysipelothrix rhusiopathiae,ER）所致全球分布的急性、熱性人畜共患傳染病。豬最易感染ER，稱為豬丹毒。ER在19世紀末被確定為人類病原體，人感染時稱為類丹毒，臨床上絕大多數表現為局限性皮膚感染，敗血癥較為罕見。我國為豬丹毒流行較嚴重的國家之一，也是類丹毒的散發地區，但在海南地區未見報道。本文報告了海南樂東黎族自治縣人民醫院收治的2例類丹毒敗血癥患者的臨床和微生物特征，為類丹毒感染診療提供重要的借鑒與參考價值。
1對象與方法
1.1研究對象
樂東黎族自治縣人民醫院2023年12月—2024年1月收治的2例經血培養確診為類丹毒敗血癥患者。
1.2病例發現與診療經過
病例1：女，45歲，4個月前喂豬時不慎跌倒，左上肢軟組織挫傷后傷口感染，以草藥外敷傷口，未見好轉。現發熱，畏寒，乏力，上肢皮膚潰瘍、流膿滲液、發黑、有惡臭味，手掌重度腫大。門診擬：“軟組織感染”入院，臨床上經驗選用阿莫西林克拉維酸鉀抗感染，同時維持電解質平衡等對癥支持治療3 d，但病情未有好轉，上肢組織感染仍然嚴重，隨時出現感染性休克等并發癥，家屬強烈要求出院，經隨訪，患者出院后3 d病亡。病例2：男，35歲，2年前宰豬時不慎切斷手指，治療后好轉，半年前河里捕魚不慎大腿皮膚劃傷后傷口感染，治療后好轉。現高熱，畏寒，乏力，頭痛，氣短。門診擬：“發熱待查”入院，臨床上經驗選用氨芐西林抗感染，同時改善循環、護胃等對癥支持治療，8 d后體溫恢復正常，復查炎癥指標正常，細菌培養陰性，身體恢復正常，好轉出院。具體見表1。
表1 2例患者基本臨床信息
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基本臨床信息 Basic clinical information |
病例1 Case 1 | 病例2 Case 2 |
|---|---|---|
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性別/年齡 Gender/Age |
女/54歲 | 男/35歲 |
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職業 Occupation |
農民 | 農民 |
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發病時間 Disease time |
2023年12月10日 | 2024年1月30日 |
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主訴 Complaint |
左上肢紅腫、熱痛，伴發熱10 d | 發熱伴氣短5 d |
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誘因 Predisposition |
4個月前喂豬時不慎跌倒，左上肢軟組織挫傷后傷口感染 | 2年前宰豬時不慎切斷手指，半年前河里捕魚不慎大腿皮膚劃傷后傷口感染 |
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臨床表現 Clinical manifestation |
發熱，畏寒，乏力，上肢皮膚潰瘍、流膿滲液、發黑、有惡臭味，手掌重度腫大 | 氣短5 d，高熱，畏寒，乏力，頭痛 |
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查體 Physical examination |
體溫：37.5 ℃，脈搏：90次/min，呼吸：22次/min，血壓：102/70 mmHg | 體溫：38.8 ℃，脈搏：116次/min，呼吸：21次/min，血壓：108/60 mmHg |
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輔助檢查 Accessory examination |
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| WBC [(4~10)×109/L] | 8.34×109/L | 14.01×109/L↑ |
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中性粒細胞百分比 NEU [(50~70)%] |
93%↑ | 85.8%↑ |
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降鈣素原 PCT [(0~0.05) ng/mL] |
0.61 ng/L↑ | 0.93 ng/mL↑ |
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前白蛋白 PA [(180~390) mg/L] |
130.4 mg/L↓ | 110.1 mg/L↓ |
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白蛋白 ALB [(40~55) g/L] |
30.5 g/L↓ | 30.6 g/L↓ |
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血沉 ESR [(0~20) mm/H] |
37 mm/H↑ | 108 mm/h↑ |
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尿素 URE [(1.7~8.3) mmol/L] |
11.34 mmol/L↑ | |
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肌酐 CRE [(44~80) μmol/L] |
117 μmol/L↑ | |
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尿酸 UA [(42~340) μmol/L] |
533.3 μmol/L↑ | |
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血糖 GLU [(3.9~6.11) mmol/L] |
9.8 mmol/L↑ | 7.96 mol/L↑ |
| CRP [(0~10) mg/L] | 105.5 mg/L↑ | |
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影像學檢查 Imaging examination |
無 | 胸部CT：心影增大，心包積液 |
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細菌培養及藥敏 Bacterial culture and drug susceptibility |
血培養16 h報陽：革蘭陽性桿菌。傷口分泌物和血培養鑒定結果：紅斑丹毒絲菌。藥敏結果：青霉素、氨芐西林、頭孢曲松、頭孢吡肟、美羅培南、紅霉素、克拉霉素和左氧氟沙星敏感 | 血培養18 h報陽：革蘭陽性桿菌。血培養鑒定結果：紅斑丹毒絲菌，藥敏結果：青霉素、氨芐西林、頭孢曲松、頭孢吡肟、美羅培南、紅霉素、克拉霉素和左氧氟沙星敏感 |
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臨床診斷 Clinical diagnosis |
蜂窩組織感染、敗血癥 | 心內膜炎、敗血癥 |
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抗生素治療 Antibiotic treatment |
阿莫西林克拉維酸，3 d | 氨芐西林，8 d |
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預后 Prognosis |
死亡 | 好轉 |
1.3菌株培養鑒定及藥敏
按照《全國臨床檢驗操作規程》，無菌采集2例患者的血液標本接種梅里埃血培養瓶放置ABCT/ALERT 3D全自動血培養系統增菌培養；血標本及傷口分泌物標本涂片，然后將其接種于廣州迪景血瓊脂平板35℃培養24 h，根據觀察菌落特征和涂片形態疑似ER，菌落進一步分離純化，經基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜法（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）和VITEK系統（法國生物梅里埃公司）鑒定和靶向DNA基因（北京知序生物科技有限公司）測序；使用微生物（鏈/腸球菌）藥敏分析系統（丹麥Biosense公司）檢測菌株對抗菌藥物的敏感性，參照美國CLSI M45標準，選擇純培養的菌落配置0.5麥氏濁度菌懸液，使用CAMHB-LHB肉湯進行藥敏試驗，35℃空氣培養20~24 h后觀察結果。當質控菌株肺炎鏈球菌ATCC 49619在控時，記錄藥敏試驗結果。
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