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藥物檢測:目標生長曲線確定孵育孔中對應的濃度梯度

目前,通過透射光強的變化模擬細菌生長狀態的變化,從而判斷孵育孔內藥物是否具有殺菌或抑菌效果。


但是將細菌樣本加入藥敏板多個孵育孔內,由于藥敏板中每個孵育孔本體透光率不同從而引入誤差,再加上光學系統也不是同一個系統,會引入光強值讀取誤差;因此,會導致細菌樣本在多個孔內的生長狀態接近,但是由于上述兩個原因疊加的誤差,也會得相差較大的透射光強數據,對于儀器的判讀標準的制定是非常不利的,從而影響了藥敏測試的準確性。


因此,亟需一種藥敏檢測方法,能夠有效提高藥敏測試的準確性。


藥敏檢測方法包括以下步驟:

獲取藥敏板各孵育孔的初始透射光強值,各所述孵育孔內有不同種類和/或不同濃度梯度的藥物。


應理解的是,在獲取藥敏板各孵育孔的初始透射光強值之前,還包括將細菌樣本和培養基接種于藥敏板的多個孵育孔。


在具體實現中,可以從待測臨床樣品平板上挑取單菌落作為細菌樣本;將所述細菌樣本接種于培養基中獲得培養基混合液,并將所述培養基混合液接種于藥敏板的多個孵育孔。


需要說明的是,將細菌樣本和培養基接種于藥敏板的多個孵育孔可以是通過人工操作的方式、獨立裝置點樣的方式或集成式點樣的方式,也可以是其他接種方式,本實施例對此不加以限制。


需要說明的是,細菌等微生物感染會引發多種疾病,不僅發病率高而且經常引發危重癥,嚴重危害人類健康和生命。因此,研究各類微生物感染疾病對應濃度梯度的抑菌或殺菌藥物是臨床醫學領域的重要問題。


可理解的是,在相關技術中,針對細菌等微生物的檢測任務包括有臨床藥敏檢測,臨床藥敏檢測是為了檢測抗菌藥物的MIC(MinimumInhibitoryConcentration,最低抑菌濃度)值,該數據有助于改善患者的預后和防止耐藥性微生物菌株的演變。確定最低抑菌濃度值,需要對微生物進行準確有效的計數。以細菌為例,傳統的細菌計數方法包括比濁法、菌落計數法、計數器測定法等。


其中,比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量,細菌懸浮液的濃度在一定范圍內于透光度成反比,與光密度成正比,此方法簡單快捷。本實施例就是通過透射光強的變化模擬細菌等微生物的生長狀態的變化,從而判斷孵育孔內對應濃度梯度的藥物是否具有殺菌或抑菌效果,從而指導用藥。


應理解的是,上述藥敏板是用來做藥敏實驗或者抗菌實驗的瓊脂平板。


在具體實現中,可以從待測臨床樣品平板上挑取單菌落作為細菌樣本;將所述細菌樣本接種于培養基中獲得培養基混合液,并將所述培養基混合液接種于藥敏板的多個孵育孔,所述孵育孔內有不同種類和不同濃度梯度的藥物。


需要說明的是,所述培養基選自BBL(美國BD公司)、Difco(美國BD公司)、Mueller-Hinton Broth(英國Oxoid公司)和Iso Sensitest肉湯(英國Oxoid公司)中的至少一種。


所述培養基具體為2×BBL培養基(美國BD公司)、2×Difco(美國BD公司)、2×Mueller-Hinton Broth(英國Oxoid公司)和2×Iso Sensitest肉湯(英國Oxoid公司)中的至少一種。


在現有技術中將細菌樣本加入藥敏板多個孵育孔內,每個孵育孔本體透光率不同引入誤差,再加上光學系統也不是同一個系統,也引入光強值讀取誤差;即便細菌樣本在多個孵育孔內生長狀態接近,由于以上兩個原因疊加的誤差,也會得相差較大的透射光強數據。


例如,以兩個孔對應兩套光學系統為例,假設兩個孔的透光率分別為0.8,0.4,兩套光學系統原始光強分別為1000,800;孵育孔內待檢測液的透光率4個時刻的變化值為0.9、0.8、0.6、0.3;那么對應第一組孔與第一套光學系統得到的光強值變化為1000*0.8*0.9=720、1000*0.8*0.8=640、1000*0.8*0.6=480、1000*0.8*0.3=240;對應第二組孔與第二套光學系統得到的光強變化為800*0.4*0.9=288、800*0.4*0.8=256、800*0.4*0.6=192、800*0.4*0.3=96。根據上述兩組數據同樣的樣本生長趨勢,得到了兩個完全不同的生長曲線,對于儀器的判讀標準的制定是非常不利的,從而影響了藥敏測試的準確性。


目標生長曲線;基于各所述目標生長曲線確定各所述孵育孔中對應的濃度梯度的藥物的效果。由于本實施例將藥敏板放入孵育系統后,在預設時間內基于第二時間間隔依次獲取各孵育孔的透射光強值;根據各透射光強值確定各孵育孔的初始透射光強值,初始透射光強值為所述透射光強值的最大值、最小值或平均值;然后基于各所述孵育孔對應的初始透射光強值和對照透射光強值,通過預設操作生成細菌樣本的目標生長曲線,最后基于各目標生長曲線確定各孵育孔中對應的濃度梯度的藥物的效果,相比于現有技術,本實施例可以有效降低檢測過程中偶然性帶來的偏差,進一步提高了藥敏檢測的準確性。


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