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蒼鷺養殖如何控制沙門菌病?用什么藥好【藥敏試驗二】

來源:中國獸醫雜志 發布時間:2025-02-17 16:36:36 瀏覽:176 次

1.2.7試驗動物剖檢及細菌分離

小鼠攻毒之后注意觀察其精神狀態和死亡情況,待小鼠死亡后,采用常規剖檢方法先將小鼠腹腔打開,再打開胸腔,觀察各個臟器的病理變化,摘下肝臟以備分離細菌所用,待剖檢后,進行細菌分離操作,以上操作都要求無菌。


1.2.8致病菌的鑒定

從死亡小鼠肝臟分離的細菌進行革蘭染色鏡檢,對比從原始病料中分離的細菌,最終確定是否是主要致病菌。


1.2.9生化鑒定

通過純培養的細菌選擇典型菌落接種于8%兔鮮血瓊脂固體試管斜面培養基上置于37℃恒溫培養箱中培養12~24h,用鉤菌環挑選典型單個菌落接種于微量生化鑒定管中,接種完后,微量生化管放于滅菌平皿中切忌要保持水平放置,置于37℃恒溫培養箱中,培養24~48h,進行觀察,記錄結果。


1.2.10藥敏試驗

采用瓊脂紙片擴增法,用高壓滅菌后的棉拭子蘸取擴大培養后的菌液均勻涂布于8%兔鮮血瓊脂培養基上,為了保證涂布均勻,需要重復涂布3次,待水分干后,貼上藥敏紙片,輕輕按壓,確保其貼穩,防止掉落和移動,注意用鑷子夾取藥敏紙片貼于平板上時要確保藥敏紙片完全與培養基接觸,以免影響藥物擴散不均勻。一個平皿貼7片紙片,最中間一塊,其余6塊均勻分布其周圍。貼好藥敏紙片后放入37℃恒溫箱中培養12~24h,觀察測量抑菌圈的大小,抑菌圈≧20mm為極度敏感;15~20mm為高度敏感;14~10mm為中度敏感;10mm以下大于0為低度敏感;等于0為不敏感。藥敏試驗操作方法按2005年版CLSI/NCCLS M100-S15所述方法進行。


2試驗結果


2.1病原菌的鑒定

從蒼鷺肝臟分離的細菌在8%兔鮮血瓊脂培養基上置于37℃恒溫箱中培養12~24h,生長菌落形態都為邊緣整齊、光滑、濕潤、半透明、略隆起的細小圓形菌落,沒有出現溶血環;S.S.瓊脂培養基上細菌生長良好,長成半透明、圓形、菌落中間有黑點的小菌落;在麥康凱培養基上都長出半透明、光滑小菌落,挑取典型菌落進行革蘭染色,結果為革蘭陰性菌,形態都為長桿狀或短桿狀菌落,多數散在。通過細菌形態觀察、染色鏡檢及生化鑒定結果最終得出該細菌為沙門菌。


2.2試驗動物攻毒

將細菌擴大培養物對小鼠進行腹腔注射后,小鼠全部在12h之內死亡,表中死亡時間為2只小鼠平均死亡時間,具體結果見表1。

表1動物攻毒試驗


2.3試驗動物病理剖檢及致病菌鑒定

通過對死亡小鼠進行病理剖檢均發現小鼠肝臟腫大、壞死,心外膜少量點狀出血,腸道黏膜嚴重出血,腸壁變薄、變黃,臌氣。剖檢完死亡小鼠取下其肝臟進行細菌分離,置于37℃恒溫培養箱中進行培養,挑取單個菌落進行革染色再鏡檢觀察,發現菌落形態大小、色澤都和原分離菌一致,鏡檢也發現和原分離菌的形態相同,因此得出原分離細菌為該病例主要致病菌。


2.4生化鑒定結果見表2。


2.5藥敏試驗結果見表3。

表2生化鑒定

表3藥敏試驗


3討論


沙門菌病和大腸桿菌病屬于條件致病菌,人和動物的沙門菌病一直是一個世界性問題,沙門菌菌型繁多,分布廣泛,是一種重要的人畜共患病的病原體。沙門菌對于我國畜牧業的威脅越來越大,而且沒有很好的有效控制辦法,長期以來,以治療、預防疾病和促進畜禽生長為目的,不合理使用抗生素,導致抗生素過度使用或濫用,在抗生素的選擇性壓力下,沙門菌耐藥性不斷上升,這已成為嚴重的公共衛生問題。沙門菌耐藥的生化反應機制主要有5種:酶對抗菌藥物的修飾或破壞;外輸泵介導抗菌藥物的主動外排;抗菌藥物的滲透障礙,導致藥物攝取減少;藥物作用靶位的改變;建立新代謝途徑,沙門菌發生耐藥性常常不是一種生化反應機制起作用,而是兩個或多個不同的生化反應機制共同作用。從而可以看出,要解決沙門菌的耐藥性問題面臨非常嚴峻的挑戰。


本試驗分離到的沙門菌可能是由于種蛋帶毒或者是由于野生放養于沼澤地而感染沙門菌,鑒于這種可能性,必須對種蛋和沼澤地的泥水進行檢測,鑒于我國國情,在生產中常用國標法,有條件的單位應用自動酶標檢測儀,ELISA,PCR試劑盒檢測,做到從源頭消滅病原菌,才能更好地控制沙門菌病。蒼鷺養殖屬于特種經濟動物養殖,養殖規模小,養殖戶數量少,可以借鑒的經驗更是很少,很多經驗都是靠養殖戶自己摸索,這無疑會走很多彎路,本試驗得出的一些數據可能對于蒼鷺養殖能起到一個參考作用。


鑒于本試驗得出的結論,對該病例的治療與預防提出以下建議措施:用環丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、甲氧芐啶進行交替使用拌料和飲水,使用多維、中草藥等增強免疫力的藥物進行輔助治療;盡量減小養殖密度,保持空氣流通;對于投喂的魚粉飼料要進行把關檢測,防治霉變及病菌污染。


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