臨床微生物實驗室藥敏試驗三種擴(kuò)散法的具體操作及試驗結(jié)果（二）
2結(jié)果觀察
運(yùn)用擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗，結(jié)果顯示如下表。
藥物敏感試驗判定標(biāo)準(zhǔn)參考表1，氧氟沙星（編號為1）、氟甲喹（編號為4）、新霉素（編號為5）；在20 mm以上均為高敏；硫氰酸紅霉素（編號為2）、林可霉素（編號為3）在10～14 mm均為中敏。
表2藥物敏感試驗結(jié)果
3結(jié)論與體會
3.1結(jié)論
通過紙片法、牛津杯法和打孔法對大腸桿菌的藥敏試驗，可得出以下結(jié)論：
打孔法不需要制作或購買藥敏片，也不用購買牛津杯，成本低，適合生產(chǎn)中應(yīng)用。打孔法3組對比，結(jié)果整齊，誤差小。打孔法直接打孔后，將藥液滴入即可。
由此可見，打孔法操作簡單，成本低，準(zhǔn)確率高，適合商品藥敏感度的測定。
3.2影響藥敏試驗的因素
3.2.1培養(yǎng)基
溶解培養(yǎng)基要用蒸餾水，一些離子如Ca2+、Mg2+、Al3+等，一定程度上影響藥敏試驗的結(jié)果。
細(xì)菌藥敏試驗的培養(yǎng)基厚度大約為4 mm，若培養(yǎng)基厚度大于4 mm，會使細(xì)菌出現(xiàn)耐藥；若小于4 mm，本應(yīng)耐藥的易出現(xiàn)敏感，這一點很關(guān)鍵。
3.2.2試紙片的影響
藥敏試紙片的試紙一般是使用加厚型的濾紙，藥敏紙片的厚度要求大約1 mm，這樣才有利于細(xì)菌的生長和藥物的擴(kuò)散速度。藥敏紙片的直徑在6.00～6.35 mm之間，紙片的厚度和直徑大小都會影響藥敏試驗的結(jié)果。
做好的紙片應(yīng)放低溫下（-10℃）保存，同時要避免潮濕，以保持抗菌藥物的活性。盛紙片小瓶自低溫處取出應(yīng)在室溫平衡至少10min后再打開，避免冷凝水影響藥效。
3.2.3細(xì)菌菌株的影響
由于各種菌對藥物的敏感性不同，產(chǎn)生的抑菌環(huán)大小不同，如果菌種不純，試驗中所產(chǎn)生的抑菌環(huán)大小與該菌種在純培養(yǎng)狀態(tài)下產(chǎn)生的抑菌環(huán)大小存在較大的差異，影響判斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此需要對各種致病菌提純后，分別進(jìn)行不同的藥敏試驗。藥敏試驗時，需要將提純后的菌種配制成一定濃度的菌液。WHO組織制定的標(biāo)準(zhǔn)是要求菌液濃度在1.5億/mL左右。若菌液濃度過高，該菌會對所有藥物產(chǎn)生耐藥；反之，菌液濃度過低，該菌會對所有藥物均敏感。
藥敏試驗中要將菌液均勻地涂在培養(yǎng)基上，使細(xì)菌均勻分布，這樣才能使試驗結(jié)果不會出現(xiàn)較大的偏差。涂菌后15 min才能貼藥敏紙片。由于涂菌后，細(xì)菌要有一段時間的適應(yīng)過程，但是時間不能過長，否則會使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥。貼藥敏紙片時，每取一種藥敏紙片必須燒一下鑷子口，避免藥敏紙片之間相互混淆，以提高藥敏的準(zhǔn)確性。藥物殺滅細(xì)菌存在一定的量比，藥敏試驗培養(yǎng)基上細(xì)菌層越厚抑菌圈就越小，反之抑菌圈就越大。
3.2.4培養(yǎng)時間的影響
一般培養(yǎng)溫度和時間為37℃8～18h，有些抗菌藥擴(kuò)散慢如多粘菌素，可將已放好抗菌藥的平板培養(yǎng)基，先置4℃冰箱內(nèi)2～4 h，使抗菌藥預(yù)擴(kuò)散，然后再放37℃溫箱中培養(yǎng)，可以推遲細(xì)菌的生長，而得到較大的抑菌圈。
3.3藥敏試驗的應(yīng)用
藥物敏感試驗后，應(yīng)選擇高敏藥物進(jìn)行治療，也可選用兩種藥物協(xié)助使用，以減少耐藥菌株。在選擇高敏藥物時應(yīng)考慮藥物的吸收途徑，因為我們藥敏實驗是藥液直接和細(xì)菌接觸，而在給畜禽用藥的時候，必須通過機(jī)體的吸收才能使藥物達(dá)到一定的效果，所以在給畜禽用藥時，高敏藥物一定要配合適宜的給藥方法，這樣才會達(dá)到好的治療效果。
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