培養(yǎng)皿暴露時(shí)間會(huì)導(dǎo)致空氣細(xì)菌總數(shù)含量變化嗎?
摘要:醫(yī)院是人流量大,且空氣細(xì)菌數(shù)量多,種類復(fù)雜的公共場(chǎng)合。其空氣細(xì)菌含量的檢測(cè)對(duì)預(yù)防疾病和細(xì)菌感染具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)用自然沉降法采集醫(yī)院空氣細(xì)菌,通過(guò)對(duì)培養(yǎng)皿暴露時(shí)間長(zhǎng)短的不同進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)。結(jié)果表明,空氣中的細(xì)菌并沒(méi)有隨培養(yǎng)皿暴露的時(shí)間越長(zhǎng)而增多,這為自然沉降法測(cè)定細(xì)菌數(shù)和醫(yī)院的清潔消毒工作提供了參考依據(jù)。
醫(yī)院感染問(wèn)題是世界范圍內(nèi)矚目的難題,如果醫(yī)院性感染大暴發(fā),不僅會(huì)導(dǎo)致大量醫(yī)療資源的浪費(fèi),以及加重患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),而且嚴(yán)重的甚至?xí)鹕鐣?huì)恐慌,因此,要加強(qiáng)對(duì)醫(yī)源性感染的認(rèn)識(shí)和理解,特別是提高醫(yī)護(hù)工作人員的思想意識(shí)。
目前針對(duì)醫(yī)院感染的控制,關(guān)鍵是在于控制感染源、自身預(yù)防和切斷傳播途徑。空氣傳播途徑包括飛沫、飛沫核和塵埃傳播方式,是細(xì)菌傳播的主要途徑之一。其傳播范圍廣,傳播速度快,途徑易實(shí)現(xiàn)且發(fā)病率高,對(duì)患者和兒童、老人等免疫力低下的人群感染性極高。因此檢測(cè)空氣中細(xì)菌含量是公共區(qū)域空氣質(zhì)量和衛(wèi)生的參數(shù)之一。此外,對(duì)于醫(yī)院病區(qū)的清潔消毒的質(zhì)量,特別是微生物檢測(cè)的結(jié)果缺少深入調(diào)研,基礎(chǔ)數(shù)據(jù)匱乏。因此,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)醫(yī)院大廳的空氣細(xì)菌進(jìn)行采樣、檢測(cè)和初步分析,為醫(yī)院感染預(yù)防提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù),并為醫(yī)院的清潔消毒工作提供了參考。
1實(shí)驗(yàn)條件與方法
1.1實(shí)驗(yàn)材料
牛肉膏蛋白胨營(yíng)養(yǎng)瓊脂、蒸餾水。
1.2實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
培養(yǎng)皿、錐形瓶、燒杯、量筒、高壓滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、恒溫培養(yǎng)箱、電子秤、酒精燈、牛皮紙、濾紙、紗布。
1.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及過(guò)程
1.3.1消毒滅菌
對(duì)實(shí)驗(yàn)需要使用的所有器具用蒸餾水洗凈并進(jìn)行滅菌,采用高壓蒸汽滅菌法,103.4KPa,121.3℃,30min。
1.3.2配制培養(yǎng)基
準(zhǔn)備培養(yǎng)皿,取40個(gè)大小相同,規(guī)格為直徑9cm的培養(yǎng)皿。利用營(yíng)養(yǎng)瓊脂制作培養(yǎng)基,培養(yǎng)基應(yīng)顏色不深、無(wú)絮狀物、無(wú)沉淀、無(wú)分層以及無(wú)氣泡為佳,然后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,30分鐘,分裝后進(jìn)行無(wú)菌檢查,24-48小時(shí)后取出觀察,若無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)則為合格。
1.3.3放置取樣
(1)采菌地點(diǎn):某醫(yī)院的大廳(室內(nèi)面積>30m2)。
(2)采樣方法:采取自然沉降法,由于室內(nèi)面積>30m2,因此可以選取房間五點(diǎn)采取法,設(shè)房間四角及中央5點(diǎn),4角采樣點(diǎn)距墻1m處,都距離地面0.5m,采樣時(shí)間分別為5min,10min,15min,每次采取分為五組。采樣結(jié)束后扣上皿蓋,用記號(hào)筆做好標(biāo)記。
1.3.4培養(yǎng)
將采集好的培養(yǎng)皿倒置并用紗布包裹,迅速送至培養(yǎng)箱進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間為2448小時(shí)。在整個(gè)過(guò)程中都要做好樣品質(zhì)量及采樣過(guò)程質(zhì)量的控制,提高結(jié)果準(zhǔn)確性及可行性。
1.3.5數(shù)據(jù)處理
對(duì)每個(gè)培養(yǎng)基上的細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù),并統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。然后用SPSS19對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn),以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2實(shí)驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)采樣結(jié)果可將實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果進(jìn)行不同時(shí)間段以及采菌布點(diǎn)進(jìn)行分析。根據(jù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù),通過(guò)t檢驗(yàn)可得結(jié)果:平皿暴露5min和10min的數(shù)據(jù)處理后,P=0.11,P>0.05,表明平皿暴露5分鐘和10分鐘對(duì)細(xì)菌數(shù)量變化影響不大;平皿暴露5min和15min的數(shù)據(jù)t檢驗(yàn)得出結(jié)果P=0.06,P>0.05,表明平皿暴露5分鐘和15分鐘對(duì)細(xì)菌數(shù)量變化影響不大。由此可見,自然沉降法中,平皿暴露時(shí)間并不是越長(zhǎng)越好,5分鐘、10分鐘和15分鐘測(cè)得的數(shù)據(jù)并無(wú)顯著差異。
各采樣點(diǎn)不同時(shí)間段細(xì)菌菌落數(shù)的比較表
3結(jié)果分析與討論
通過(guò)數(shù)據(jù)對(duì)五個(gè)地點(diǎn)進(jìn)行培養(yǎng)皿暴露時(shí)間的比較,得出同一方位的細(xì)菌總數(shù)含量并不隨時(shí)間的增長(zhǎng)而增加,因此,人們不用擔(dān)心在醫(yī)院的時(shí)間越長(zhǎng),越易發(fā)生醫(yī)源性感染。通過(guò)對(duì)不同方位進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)東南和西南的細(xì)菌總數(shù)明顯多于西北和東北的細(xì)菌總數(shù),由于做實(shí)驗(yàn)時(shí),西南角為繳費(fèi)處,人流量大,東南角,靠近樓梯,空間較小,空間流通速度慢,加之人流量大,在綜合因素影響下,數(shù)據(jù)結(jié)果顯示,此兩處空氣細(xì)菌的計(jì)數(shù)總數(shù)較多;東北角靠近走廊,空氣流通速度快,人流量較少,西北角,人數(shù)少,偶爾有人,在綜合因素影響下,數(shù)據(jù)結(jié)果顯示,此兩處空氣細(xì)菌的計(jì)數(shù)總數(shù)較少。由此可見,空氣細(xì)菌總數(shù)還受人流量、空氣濕度,空氣流通速度以及空間大小等不確定因素的影響。
通過(guò)本次研究,檢測(cè)醫(yī)院空氣細(xì)菌的總數(shù)反映了培養(yǎng)皿的暴露時(shí)間與細(xì)菌總數(shù)無(wú)多大的關(guān)系,但很好的反映了細(xì)菌計(jì)數(shù)還受其他因素影響因素。同時(shí),為對(duì)減少醫(yī)源性感染和為醫(yī)院的清潔消毒工作提供了參考,以便醫(yī)院采取相應(yīng)的措施,來(lái)改善空氣質(zhì)量,避免醫(yī)源性感染。
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