復方大果木姜子軟膠囊對腫瘤細胞Hep-2生長曲線的影響
研究復方大果木姜子軟膠囊對腫瘤細胞Hep-2的拮抗作用。方法臺盼藍染色法及生長曲線法。結果通過觀察藥物作用于細胞后對其正常生長曲線的影響,發現藥物作用于Hep-2細胞后,明顯延長細胞正常生長的倍增時(TD2=3.245)從而抑制Hep-2的正常生長。結論復方大果木姜子軟膠囊對腫瘤細胞Hep-2的生長具有明顯的抑制作用。
實驗過程
取處于對數生長期的Hep-2,用含10%新生牛血清的RPMI1640培養基配制為1×104/ml的細胞懸液,在25 ml培養瓶中接種5 ml,共接種21瓶,分為正常組、藥物組與陽性對照組(每組7瓶),分別加入終濃度為EC50的受試藥物與對照藥物,在給藥2 h,1、2、3、4、5、7 d時分別取樣40μl(取樣時先用2.5%的胰蛋白酶將貼壁細胞充分消化),加入0.4%的臺盼藍試劑10μl染色后,在顯微鏡下進行細胞計數,以每天細胞計數結果的對數為縱軸,以時間為橫軸繪制細胞生長曲線,對比觀察藥物對各實驗細胞的生長抑制作用,結果見表2及繪制的各實驗組在不同實驗條件下的細胞生長抑制曲線圖,見圖1。
實驗結果及分析
依據藥物作用于細胞倍增時(TD)公式：TD=0.301 t/(logNtlogNo)(t：培養時間,No：首次記下的細胞數,Nt：t時間后的細胞數)可以求得：空白組TD1=1.081；藥物組TD2=3.245；對照組TD3=2.361。
通過上述數據分析可知：與空白組細胞正常倍增時(TD1=1.081)比較,復方組作用于Hep-2細胞后可以明顯的延長細胞的倍增時(TD2=3.245),且作用強于對照組(TD3=2.361)；同時,結果表明,復方對Hep-2細胞的抑制作用是通過影響Hep-2細胞的正常生長周期而發揮作用。
藥物對Hep-2細胞生長飽和密度的影響(NS)：從細胞生長抑制圖中可以看出,藥物作用于Hep-2細胞后,明顯影響其正常生長,細胞生長飽和密度顯著降低,與正常組細胞比較,細胞生長達大坪期的時間與細胞數目顯著降低,但作用與喜樹堿相比略差。
結論：本研究以Hep-2細胞株為篩選模型,采用體外抑制腫瘤增殖的方法,對復方大果木姜子軟膠囊的藥物有效部位采用臺盼藍染色法結合細胞生長曲線繪制從而直觀的表明實驗藥物對Hep-2的生長抑制作用。