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高齡婦女的生育能力下降,LED光照或能改善卵巢功能

來源:北京大學人民醫院 發布時間:2024-05-27 13:02:04 瀏覽:607 次

新型光源-發光二極管作為光治療的一種新手段在健康和醫療中的應用尚處于起步階段,且近年來隨著國內LED芯片技術的快速提高,新型LED光源因壽命長、光譜窄、產熱低、光電轉化率高等優勢使其開始被應用于健康和醫學領域,并且快速發展。尤其在代謝、心血管、神經、皮膚及免疫系統疾病,LED無創光療對能夠起到防治和輔助性治療的作用,臨床需求巨大。


光療作為一種有效的治療手段,在臨床和工程上正得到越來越廣泛的應用,其理論基礎是生物組織吸收光能并將光能轉化為熱能和化學能,從而導致體內產生一系列的化學反應,這些化學反應包括光致分解、光致氧化、光致聚合和光致敏化,LED作為一種新型光源,隨著光的生物效應逐步被人們所認識,正逐步應用于醫學中并發揮積極的作用。


當前女性晚婚晚育趨勢增加,高齡婦女的生育能力下降成為了一個嚴峻的社會和醫學挑戰。

綜上所述的問題,為此,提出一種窄帶LED光設備及使用該LED光照改善卵巢功能的方法。


窄帶LED光設備的LED光照改善卵巢功能的方法,包括以下步驟:


步驟S1、小鼠選擇和分組:


第一部分選用7月齡C57雌鼠,第二部分選用2月齡C57雌鼠,并將小鼠隨機分為自然光對照組和不同波長LED光照射組,每組6只小鼠,在新環境中適應一周后將小鼠背部剃毛,確定照射位置并標記;


步驟S2、窄帶LED光設備的組裝,以及設置;


步驟S21、將實驗鼠透明罩505放置入LED光源架501的實驗腔504內部;


步驟S22、將小鼠放置入實驗鼠透明罩505的內部,再通過轉柄508轉動調節螺桿507推動實驗鼠壓板506移動,使得實驗鼠壓板506將壓力作用于小鼠,將小鼠壓在實驗鼠透明罩505的內部;


步驟S23、在50mw光功率密度下,用不同波長的LED照射燈503LED光照射小鼠5min,連續照射15天,模擬臨床治療3個療程;


步驟S3、將處理后的雌鼠通過陰道抹片檢測發情周期;


步驟S4、雌鼠激素測定;


步驟S41、LED光照射結束后,在小鼠處于發情間期時,對小鼠行眼眶采血,收集到1.5mL離心管中靜置,4℃過夜,3500rmp離心5min,吸取上層血清,-80℃凍存;


步驟S42、用放射免疫法測定血清中檢測血清中促卵泡生成激素(FSH)、促黃體生成激素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睪酮(T)、催乳激素(PRL)、AMH激素水平;


步驟S5、卵巢組織采集和組織學評估;


步驟S51、在取血后,將小鼠安樂處死,取出卵巢組織,一個卵巢凍到-80℃冰箱,另一個卵巢進行固定、包埋和切片處理;


步驟S52、對組織連續切片后進行染色,對染色的連續切片進行計數,計數方法為每五張連續切片中,隨機選取一張對其中的卵母細胞(DDX4陽性)的數量進行統計;


步驟S53、將統計結果加和,再乘以校正數值(5),即為最終的卵巢中各級卵泡數;


步驟S6、基因表達分析:


步驟S61、使用RT-PCR和RNA-seq技術,對實驗組和對照組卵巢組織的總RNA進行基因表達分析;


步驟S62、使用免疫組化染色技術,檢測卵巢組織中標記分子的分布情況;


步驟S7、后代評估:對產下的仔鼠每隔7天進行拍照并觀察其狀態,并每隔7天測量仔鼠的體重,記錄體重數據以便繪制生長曲線,以評估仔鼠的生長速度和趨勢;


步驟S8、數據分析和統計:對見栓率、懷孕率和產仔數進行統計學分析,比較實驗組和對照組之間的差異;


陰道栓檢查和配種實驗檢測見栓率、懷孕率;


見栓率=見栓雌鼠/總交配雌鼠


懷孕率=產仔的雌鼠數/見栓的雌鼠數。


該設備檢測紅光到紅外波段的窄帶LED光對高齡卵巢功能及受孕能力的影響,數據表明630nm LED光,光功率密度為50mW,光照5min可以提高高齡小鼠的受孕能力和平均窩產仔數,提高AMH水平。


該設備檢測紅光到紅外波段的窄帶LED光療在促進損傷子宮內膜和薄型子宮內膜修復方面的作用,結果表明630nm LED光,光功率密度為50mW,光照5min可以修復薄型子宮,使部分小鼠懷孕,但同時該條件下LED光照射可能會有一定程度的副作用,需要進一步篩選合適的LED光波長及光功率密度。


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