?典型的傳統(tǒng)細(xì)菌計(jì)數(shù)方法兩大不足之處
典型的傳統(tǒng)細(xì)菌計(jì)數(shù)方法主要有平板計(jì)數(shù)法和最大或然計(jì)數(shù)法(MPN法)等等，這些方法均在固體或液體培養(yǎng)基中對(duì)待測(cè)菌種進(jìn)行培養(yǎng)，然后根據(jù)培養(yǎng)后顯現(xiàn)出的宏觀結(jié)果(例如菌落密度(平板計(jì)數(shù)法)、液體培養(yǎng)基的顯色情況(MPN法))來判斷原始樣品中的活菌濃度。這些方法普遍存在以下兩個(gè)最主要的不足之處。
(1)培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)。細(xì)菌對(duì)培養(yǎng)基的適應(yīng)以及細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖都需要一定的時(shí)間，所以產(chǎn)生可觀測(cè)到的結(jié)果需要較長(zhǎng)的時(shí)間，通常在24 h以上甚至一周左右。
(2)培養(yǎng)條件對(duì)結(jié)果影響大。傳統(tǒng)方法中，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間等對(duì)檢測(cè)結(jié)果都有很大的影響，一種培養(yǎng)基往往僅能檢測(cè)出一種或數(shù)種能夠在該培養(yǎng)基中生存的細(xì)菌的數(shù)目，這只占實(shí)際細(xì)菌數(shù)量的極少部分，例如通常的平板計(jì)數(shù)只能檢測(cè)到水中細(xì)菌數(shù)目的0.1%～10%，從而大大影響了結(jié)果的準(zhǔn)確性。表1給出了應(yīng)用平板計(jì)數(shù)法對(duì)各類水樣中的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，所能檢測(cè)到的細(xì)菌數(shù)占實(shí)際細(xì)菌數(shù)的比例。
傳統(tǒng)活菌計(jì)數(shù)方法的上述缺點(diǎn)，在很大程度上限制了其在環(huán)境微生物學(xué)中的應(yīng)用范圍。另外，水樣中的細(xì)菌種類繁多，不可能也沒有必要在任何情況下都分門別類地對(duì)各種細(xì)菌都單獨(dú)培養(yǎng)計(jì)數(shù)。而且，在實(shí)際情況下，一個(gè)有限范圍內(nèi)的各種細(xì)菌之間不可避免地發(fā)生著相互作用，水體的宏觀微生物學(xué)特性是它們共同作用的結(jié)果。而所有的傳統(tǒng)技術(shù)在培養(yǎng)過程中都將細(xì)菌置于偏離它們?cè)瓉淼男…h(huán)境的、新的人為的操縱條件下，使其形成與原來并不完全相同的群落結(jié)構(gòu)，甚至引起細(xì)菌偏離在自然狀況下的生理習(xí)性，從而不能反映出它們的實(shí)際生長(zhǎng)情況。因此，通過任何傳統(tǒng)活菌計(jì)數(shù)技術(shù)都不能全面客觀地認(rèn)識(shí)水體微生物特性。
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