納豆芽胞桿菌生理生化鑒定、生長(zhǎng)曲線及產(chǎn)納豆激酶的酶活力
[目的]篩選并鑒定納豆芽胞桿菌。[方法]篩選芽胞桿菌，顯微鏡觀察其菌落形態(tài)，生理生化鑒定，測(cè)定其生長(zhǎng)曲線及產(chǎn)納豆激酶的酶活力。
[結(jié)果]篩選到一株產(chǎn)納豆激酶的納豆芽胞桿菌ZD023。該菌最高酶活力可以達(dá)263.38 IU/ml。
[結(jié)論]篩選到一株產(chǎn)納豆激酶的納豆芽胞桿菌ZD023，為下一步開(kāi)發(fā)成具有溶栓功能的食品或藥品奠定基礎(chǔ)。
血栓疾病是一類嚴(yán)重危害人類健康和生命的疾病，包括心血栓、腦血栓、肺栓塞和末梢動(dòng)靜脈血栓等常見(jiàn)疾病[1]。隨著我國(guó)人們生活水平的提高，膳食中高脂肪、高蛋白被過(guò)量攝取，血栓性疾病已超過(guò)癌癥和糖尿病成為第一大健康殺手，每年約有350萬(wàn)人死于心血管病，占總死亡原因的41%[1]。因此，研究開(kāi)發(fā)治療血栓性疾病的藥物一直是醫(yī)學(xué)上的熱點(diǎn)。
1987年須見(jiàn)洋行[2]博士首先發(fā)現(xiàn)了溶解血栓的生物武器——納豆激酶（Nattokinase，NK）。它是由納豆芽胞桿菌（Bacillus natto）產(chǎn)生的一種具有纖溶活性的中性絲氨酸蛋白酶。它可用于治療和預(yù)防血栓病，通過(guò)口服直接溶解血栓，被認(rèn)為是一種非常有前途的溶血栓和抗血栓藥物。由于納豆激酶的優(yōu)點(diǎn)，近年圍繞納豆激酶生產(chǎn)菌株篩選的工作方興未艾。該研究從湖北武漢市土壤中篩選到一株產(chǎn)納豆激酶的納豆芽胞桿菌ZD023，研究了菌落形態(tài)，進(jìn)行生理生化鑒定及16S rRNA基因比對(duì)，采用纖維蛋白平板法測(cè)定了其產(chǎn)納豆激酶的酶活力，為下一步開(kāi)發(fā)成具有溶栓功能的食品或者藥品奠定基礎(chǔ)。
對(duì)該菌株進(jìn)行菌落形態(tài)、細(xì)胞形態(tài)觀察。通過(guò)生理生化分析及16S rRNA基因分析，初步認(rèn)定該菌為納豆芽胞桿菌；同時(shí)，測(cè)定了30℃LB液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)曲線以及發(fā)酵時(shí)間與產(chǎn)納豆激酶的關(guān)系，該菌最高酶活力可以達(dá)263.38 IU/ml。這為下一步研究其液體發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶進(jìn)行溶栓藥物的研究且開(kāi)發(fā)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的生物溶栓藥物奠定基礎(chǔ)。
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