滸苔多糖降解微生物采集、分離、篩選、鑒定及生長(zhǎng)曲線測(cè)定（三）
2.3菌株多糖底物分析及滸苔多糖降解菌的篩選
用BIOLOG對(duì)Alteromonas confluentis A1-6及3株黃桿菌Polaribacter marinaquae A2-2、Cellulophaga lytica aA-7和Maribacter dokdonensis aA-9的碳源利用譜進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表3。從表3可見(jiàn)，在PM2A板的碳源底物中，4株菌都能利用果膠（Pectin）；除Polaribacter marinaquae A2-2外，其他3株菌都能利用糊精（Dextrin）；只有Cellulophaga lytica aA-7可以利用硫酸軟骨素C（Chondroitin Sulfate C）。4株菌都不能利用甘露聚糖（Mannan）、明膠（Gelatin）、菊粉（Inulin）、環(huán)糊精（α-/β-/γ-Cyclodextrin）、糖原（Glycogen）。
2.4菌種生長(zhǎng)曲線的測(cè)定
為了進(jìn)一步檢測(cè)篩選的菌株對(duì)滸苔多糖及其他碳源的利用情況，挑選交替單胞菌Alteromonas confluentis A1-6（圖3（a）和黃桿菌Algibacter lectus S7（圖3（b））2株菌進(jìn)行生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)，并繪制了菌株Algibacter lectus S7（圖4）和Alteromonas confluentis A1-6（圖5）在添加了不同碳源的2216E液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線。
圖3（a）為γ變形菌門的交替單胞菌Alteromonas confluentis A1-6的菌落形態(tài)，其菌落呈乳白色，全緣，菌落表面濕潤(rùn)光滑，光澤度好。圖3（b）—圖3（e）分別為擬桿菌門的黃桿菌Algibacter lectus S7、Polaribacter marinaquae A2-2、Cellulophaga lytica aA1-7和Maribacter dokdonensis aA1-9的菌落形態(tài)，可見(jiàn)其菌落均呈橙色或黃色，全緣，表面濕潤(rùn)光滑。其中菌株S7和A2-2菌落形態(tài)和顏色相似；菌株aA1-7菌落更為濕潤(rùn)且呈現(xiàn)微弱的綠色熒光；菌株aA1-9菌落顏色為淺黃色。
菌株S7在不同碳源2216E培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線如圖4所示，黃桿菌Algibacter lectus S7在葡萄糖、半乳糖、滸苔多糖、木聚糖及蔗糖中的生長(zhǎng)較對(duì)照組明顯增強(qiáng)，說(shuō)明菌株S7可以利用這些糖作為碳源生長(zhǎng)。這些碳源中葡萄糖、半乳糖為單糖，蔗糖為二糖，滸苔多糖和木聚糖為多糖，說(shuō)明菌株S7能分解利用滸苔多糖和木聚糖。菌株在乳糖、果糖、可溶性淀粉中的生長(zhǎng)曲線在對(duì)照組之下，可見(jiàn)菌株S7對(duì)乳糖、果糖、可溶性淀粉幾乎沒(méi)有利用，同時(shí)菌株在糊精、明膠及麥芽糖中的生長(zhǎng)與對(duì)照差不多，無(wú)明顯生長(zhǎng)，說(shuō)明菌株S7不能利用這些碳源。重點(diǎn)對(duì)比木聚糖和滸苔多糖，可以看出菌株S7對(duì)木聚糖的利用曲線在滸苔多糖曲線之下，但相差不大，可以猜想菌株S7對(duì)滸苔多糖的降解可能是作用在與木聚糖結(jié)構(gòu)相似的木糖單體上。簡(jiǎn)而言之，菌株S7能利用滸苔多糖、木聚糖、半乳糖和蔗糖，但不能利用可溶性淀粉、糊精、麥芽糖、明膠、乳糖和果糖。
菌株Alteromonas Confluentis A1-6在不同碳源2216E培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線如圖5所示。與對(duì)照組相比，交替單胞菌Alteromonas confluentis A1-6除了在明膠和果糖中無(wú)明顯生長(zhǎng)外，其他碳源中都有生長(zhǎng)，說(shuō)明交替單胞菌A1-6對(duì)碳源的利用較黃桿菌S7更具有廣譜性。其中對(duì)滸苔多糖、半乳糖和糊精的利用最明顯，以這些碳源作底物，菌體的生長(zhǎng)情況較其他糖類物質(zhì)作底物時(shí)更好。菌株A1-6不能利用明膠和果糖，可以利用葡萄糖、滸苔多糖、半乳糖、乳糖、木聚糖、蔗糖、可溶性淀粉、麥芽糖和糊精。
通過(guò)以上分析，可以得出菌株Alteromonas confluentis A1-6和黃桿菌Algibacter lectus S7都可以利用滸苔多糖進(jìn)行生長(zhǎng)，且生長(zhǎng)情況較好。同時(shí)，生長(zhǎng)測(cè)試實(shí)驗(yàn)中所選取的糖類碳源并不是都能被菌株A1-6和S7利用，這說(shuō)明不同菌株對(duì)于碳源底物的利用是有選擇性的。菌株的碳源利用譜越廣，則菌株對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力越強(qiáng)，能占據(jù)更多的生態(tài)位。這可能是Alteromonas confluentis（菌株A1-6）可以同時(shí)在廣西北海和山東青島2個(gè)采樣地都分離到的原因之一。
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