銀杏黑斑病和輪紋病病菌生長、產孢試驗和孢子萌發試驗(二)
3結果
3.1病原菌生長和產孢試驗
3.1.1溫度對病原菌生長和產孢的影響
從表1可看出,黑斑病菌在10℃~35℃都能生長和產孢,生長適宜范圍為20℃~30℃,最適25℃;35℃產孢最多。輪紋病菌的生長溫度為10℃~30℃,不能夠耐35℃的高溫,適宜范圍為20℃~25℃,最適25℃;該菌在10℃條件下不能產孢,20℃和25℃時產孢量大,兩處理間不存在顯著性差異,兩者與其余處理相比均達到顯著水平。
3.1.2濕度對病原菌生長和產孢的影響
表2不同濕度對黑斑病菌和輪紋病菌生長和產孢的影響
從表2可看出,2種菌在相對濕度65%以上都能很好地生長。黑斑病菌在RH為75%和85%時,生長速度和產孢量都沒有顯著性差異,此時生長速度最快,RH98%時產孢最多。輪紋病菌在RH75%生長最快,RH98%產孢量最大,在RH75%~85%范圍內,產孢量沒有達到顯著水平。
3.1.3培養基對病原菌生長和產孢的影響
表3不同培養基對黑斑病菌和輪紋病菌生長和產孢的影響
由表3可知,2種菌在PDA培養基上比在WA、GLA上生長快,且產孢量大,特別是輪紋病菌,在PDA培養基上的產孢量是WA、GLA上的44~70倍。2種菌在WA培養基上生長得很稀疏,產孢量小;在PDA上,菌絲濃密,輪紋病菌還形成內緣菌絲稀疏、外緣菌絲濃密的同心環型菌落;在GLA上的菌落較PDA上的稀疏,輪紋病菌也不形成同心環型菌落。
3.1.4酸堿度對病原菌生長和產孢的影響
試驗結果(表4)表明,2種菌在pH值<2都不能生長,生長和產孢pH值范圍為4~11,并且以pH值5~11基質中生長為好。黑斑病菌在pH值為11的基質中生長快,但此時菌落稀疏,產孢量較少;pH值為7時,該菌生長速度僅次于pH值11,且菌絲濃密,產孢量最大;在pH值4~5和pH值9~11范圍內的產孢量沒有達到極顯著水平。輪紋病菌在pH值4~9基質中形成同心環型菌落,其中以pH值為5的基質上生長最好,氣生菌絲發達,菌落濃密,pH值為4和pH值為9的產孢量最大,兩處理間的產孢量沒有顯著性差異。
3.1.5光照對病原菌生長和產孢的影響
從表5可知,光照對黑斑病菌的生長、產孢,以及對輪紋病菌的生長都沒有顯著的影響。對于輪紋病菌,日光燈照射4d后開始形成分生孢子,自然光照射6d后形成少許分生孢子,全黑暗條件下8d開始形成分生孢子。由此可見,光照能促進輪紋病菌分生孢子的形成,且日光燈照射比自然光照射,產孢量多1倍以上。
3.2孢子萌發試驗
3.2.1溫度對分生孢子萌發的影響
從表6可看出,2種菌的分生孢子萌發溫度是10℃~35℃。黑斑病菌孢子萌發適溫為20℃~35℃,此范圍內,該菌分生孢子24h時的萌發率未達α?.??顯著水平。輪紋病菌的分生孢子萌發適宜溫度為15℃~30℃,最適為20℃。另外,在10℃的培養條件下,2種病原菌的分生孢子培養8h都沒有開始萌發,在15℃~35℃范圍內,8h的萌發率最低為6.37%,最高達86.98%。
3.2.2濕度對分生孢子萌發的影響
從表7可看出,2種菌的孢子在RH100%+水滴、RH100%條件下萌發較好,最適的是RH100%+水滴的萌發條件。黑斑病菌的分生孢子在泡水、RH90%的條件下培養8h都沒有開始萌發,輪紋病菌的孢子在泡水處理中8h的發芽率為0,24h的萌發率為5.8%,而在RH90%條件下,培養24h都沒有萌發。
3.2.3酸堿度對分生孢子萌發的影響
從表8可看出,2種菌的分生孢子在pH值2~11都能萌發。黑斑病菌的分生孢子萌發適宜pH值為2~7,最適pH值為4~5;輪紋病菌的孢子在pH值2~5范圍萌發較好,最適為pH值4。由此可見,偏酸性的環境有利于黑斑病菌和輪紋病菌的分生孢子萌發,尤其是后者。
3.2.4培養液對分生孢子萌發的影響
從表9可看出,黑斑病菌的分生孢子24h的發芽率在α?.??水平上沒有顯著性差異,說明該菌分生孢子萌發與培養液有無養分沒有顯著關系。而輪紋病菌的分生孢子在銀杏葉汁稀液和1%葡萄糖液中的萌發率高,且不存在顯著性差異;但與在無菌水中萌發比較就存在顯著性差異。
4討論
朱克恭研究認為銀杏葉枯病的病原菌中,黑斑病菌在6月~10月都有大量的出現,而輪紋病在高溫季節很少出現,僅在10月份才有所增加。本實驗得到相似的結果,輪紋病菌不能耐35℃的高溫,黑斑病菌耐高溫的能力強。2種菌在RH65%以上都生長好,適宜的相對濕度為75%~85%,試驗結果表明:相對濕度大有利于分生孢子形成;飽和濕度且有水滴的培養條件,分生孢子的發芽率最高。因此,在綜合防治中,清除銀杏果園內的雜草,降低地表面的相對濕度,可以在一定程度上減少侵染來源。泡水處理中,分生孢子的發芽率低,也許與缺氧有關。
總的來說,黑斑病菌生長、發育和產孢的溫度范圍都比輪紋病菌的廣,黑斑病菌的產孢對光照反應不敏感,其分生孢子萌發對營養的要求也不高,對寄主植物有更大的威脅性。朱克恭在對銀杏葉枯病的研究中,認為黑斑病菌占病原菌的主要地位,其不僅能以菌絲體在芽、落葉組織內越冬,還能以分生孢子在落葉內越冬,且長期存活,以至于黑斑病菌能夠成為病葉組織內的主要病原菌。這些說明黑斑病菌對外界環境有較強的適應性,對銀杏葉的危害起主要作用。
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