生鮮乳中菌落總數要求及測定方法
食品安全國家標準中規定：生鮮乳中菌落總數應小于或等于200萬cfu/mL。目前，生鮮乳菌落總數的測定方法主要為國標法，關于菌落總數檢測片檢測生鮮乳中菌落總數的報道較少，本試驗主要通過將菌落總數檢測片法和國標法的檢測結果作為對比，以討論菌落總數檢測片方法的可行性。
1材料與方法
1.1儀器與設備
生化培養箱；自動壓力蒸汽滅菌器；玻璃試管；移液槍。
1.2材料與試劑
營養瓊脂；生理鹽水；細菌總數檢測片(Charm)；一次性滅菌槍頭；一次性使用培養皿。
1.3試驗內容及方法
將隨機抽取的50批生鮮乳樣品分別進行檢測片法和國標法檢測，國標法檢測作為對照組，檢測片法檢測作為試驗組。對照組檢測依據國標法GB 4789.2-2010。用無菌槍頭吸取生鮮乳樣品25 mL置225 mL裝有無菌生理鹽水的無菌均質袋中，拍打1～2 min，選擇三個適宜稀釋度(10-3、10-4、10-5)進行稀釋，分別將三個稀釋度樣品于無菌培養皿內，同時作空白對照。將培養基倒入培養皿內，使其混合均勻。瓊脂凝固后置于(36±1)℃培養箱內倒置培養(48±2)h，記錄稀釋倍數和相應的菌落數量，菌落計數以菌落形成單位(CFU)表示。
試驗組應用菌落總數檢測片進行檢測。分別取上述對照組中三個稀釋度(10-3、10-4、10-5)的樣品1 mL加入檢測片內，同時作空白對照。標記檢測片，提起粘合片，豎直加入樣品，重新蓋上粘合片，保持表面平整。培養方法與菌落計數同對照組。
1.4結果計算
選取菌落數為30～300CFU，無蔓延菌落生長的培養皿計數菌落總數。若只有1個稀釋度平板上的菌落數在適宜計數范圍內，計算2個平板菌落數的平均值；若2個連續稀釋度的平板菌落數在適宜計數范圍內時，按計算公式：N=ΣC/(n1+0.1n2)d。(注：N—樣品中菌落數；∑C—平板菌落數之和；n1—第1稀釋度平板個數；n2—第2稀釋度平板個數；d—稀釋因子。)
1.5統計學方法
2檢測結果
從表1可知，兩組空白對照均無菌落生長；在相同條件下，計算2組菌落總數結果顯示，試驗組的菌落總數與對照組相比較低，但差異不顯著(P>0.05)。
表1兩種不同檢測方法對生鮮乳菌落總數檢測的結果比較
3討論
生鮮乳的質量檢測包括理化檢驗以及菌落總數等，菌落總數是反應生鮮乳質量的一個重要指標。其檢測方法包括國標法和快速檢測方法。傳統的國標法檢測生鮮乳中的菌落總數較為準確，但是操作相對復雜，使用的材料也相對較多。隨著檢測技術的快速發展，不斷研發出先進的檢測方法。菌落總數檢測片是用來檢測食品中菌落總數的一種新方法，它以標準瓊脂方法為基礎，其培養基中含有酶的底物2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)，此種底物可以被活菌還原成紅色。所以，在經過加樣和培養后，細菌菌落在檢測片上顯出紅色的菌斑，方便觀察和計數。菌落總數檢測片是一種可以代替普通培養皿的新型檢測產品，優點包括無需配制培養基，方便攜帶和使用，培養時可疊加，節省空間。其操作和結果觀察都較為簡便可靠。綜上所述，應用菌落總數檢測片檢測生鮮乳中菌落總數具有一定的應用價值，且操作方便，易于攜帶，值得推廣。
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