4種培養(yǎng)基和8種農(nóng)藥對蠟蚧蚧輪枝菌生長發(fā)育的影響
摘要
在25℃條件下，測定了4種培養(yǎng)基和8種農(nóng)藥對蠟蚧蚧輪枝菌生長發(fā)育的影響。結(jié)果表明，馬鈴薯葡萄糖和查氏培養(yǎng)基最適于菌絲生長和產(chǎn)生分生孢子。所有供試農(nóng)藥對蠟蚧蚧輪枝菌菌絲生長均有顯著的抑制作用,其中代森錳鋅的抑菌率高達(dá)100%，其次為代森鋅、百菌清及敵敵畏，再次為氯氰菊酯和阿維柴油，鏈霉素和氟蟲腈腈的抑菌率最低。
蠟蚧蚧輪枝菌(Verticillium lecanii)屬半知菌亞門、絲孢綱、輪枝菌屬，是一種地理分布和寄主范圍均比較廣泛的昆蟲病原真菌和植物病原菌的重寄生菌。目前，西歐、蘇、美等許多國家對該菌已有廣泛深入的研究，并已用于害蟲的生物防治。在我國,蠟蚧蚧輪枝菌于1959年臺灣省曾有記載。此后貴州、廣州、湖南、北京等相繼發(fā)現(xiàn)該菌寄生于蚧蚧類、蚜蚜類、蛾類、步行蟲等昆蟲。我國對蠟蚧蚧輪枝菌的研究起步較晚，多見于20世紀(jì)90年代。研究內(nèi)容主要包括紫外線對蠟蚧蚧輪枝菌原生質(zhì)體的誘變效果、溫度和營養(yǎng)對蠟蚧蚧輪枝菌生長發(fā)育的影響、生物學(xué)特性、發(fā)酵培養(yǎng)及其影響因子及對害蟲的致病性及防治應(yīng)用。目前，化學(xué)農(nóng)藥仍然是防治農(nóng)業(yè)病蟲害的主要手段之一，協(xié)調(diào)好生物防治和化學(xué)防治的關(guān)系對農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。李振等比較了28種農(nóng)藥對蠟蚧蚧輪枝菌生長發(fā)育的影響，但農(nóng)藥的更新?lián)Q代很快。因此，本文在研究不同培養(yǎng)基對蠟蚧蚧輪枝菌生長發(fā)育的基礎(chǔ)上，測定了目前幾種常用農(nóng)藥對蠟蚧蚧輪枝菌的影響，以期為協(xié)調(diào)使用蠟蚧蚧輪枝菌和化學(xué)農(nóng)藥提供必要的依據(jù)。
1材料與方法
1.1材料
1.1.1供試培養(yǎng)基
馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)、玉米粉培養(yǎng)基、查氏培養(yǎng)基和燕麥片瓊脂培養(yǎng)基。
1.1.2供試藥劑(表1)
表1供試藥劑及稀釋倍數(shù)
1.2方法
1.2.1菌落生長速度及產(chǎn)孢量的測定
用涂布法將菌株接種于PDA平板,在25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6d后,用直徑為7mm打孔器取相同大小的菌餅,分別接種于PDA培養(yǎng)基、玉米粉培養(yǎng)基、查氏培養(yǎng)基、燕麥片瓊膠培養(yǎng)基的平板中央，每處理重復(fù)3次，并將其置于25℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),連續(xù)觀察6d,每日定時測量菌落的直徑,第6d測定產(chǎn)孢量。
1.2.2農(nóng)藥對蠟蚧蚧輪枝菌菌絲生長的影響
先將8種農(nóng)藥分別配置100倍稀釋液，然后按照常規(guī)田間推薦使用濃度(表1),分別移取一定量的稀釋藥液與100mL已溶化的PDA混勻，制成含藥PDA平板待用。然后用直徑7mm的打孔器移取已培養(yǎng)4d的菌塊接種至平板中央,倒置于25℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。每個處理4次重復(fù)，以不含藥的PDA平板為對照。每天觀察菌落生長情況并測量其直徑，測量7d。同時，以第7天的菌落生長直徑作顯著性檢驗，并求出各種藥劑的抑菌率。
抑菌率=(對照平皿菌落直徑一加藥平皿菌落直徑)/對照平皿菌落直徑x100%。
2結(jié)果與分析
2.1蠟蚧蚧輪枝菌在4種培養(yǎng)基上的生長速率
由圖1可看出蠟蚧蚧輪枝菌在接種1d后，在PDA培養(yǎng)基上生長最快，其次為查氏培養(yǎng)基，而在其他兩種培養(yǎng)基增長不明顯;第2天和第3天在查氏培養(yǎng)基上生長最快;第4~6天在PDA和查氏培養(yǎng)基上生長最快，其次為玉米粉培養(yǎng)基，最次為燕麥片培養(yǎng)基。以接種后的天數(shù)為自變量，以菌落直徑為因變量進(jìn)行回歸分析，結(jié)果表明兩者呈極顯著的直線回歸關(guān)系(表2)。根據(jù)其斜率值的大小可知4種培養(yǎng)基上菌落的生長速率大小依次為查氏>PDA>玉米粉>燕麥片。
表2蠟蚧蚧輪枝菌在不同培養(yǎng)基上生長速率的回歸分析
2.2蠟蚧蚧輪枝菌在4種培養(yǎng)基上的產(chǎn)孢量
由表3看出，蠟蚧蚧輪枝菌在查氏和PDA培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于在玉米粉和燕麥片培養(yǎng)基上的產(chǎn)孢量(p<0.01),說明查氏和PDA培養(yǎng)基比玉米粉和燕麥片培養(yǎng)基更適合蠟蚧蚧輪枝菌分生孢子形成。
表3蠟蚧蚧輪枝菌在4種培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量1)
1)同列數(shù)據(jù)后具有不同大小寫字母者表示在0.01和0.05水平有顯著差異。
2.3農(nóng)藥對菌絲生長的影響
以第7d的菌落直徑作顯著性測驗表明(表4)，8種農(nóng)藥均與對照存在極顯著差異(p<0.01),供試的各種農(nóng)藥對蠟蚧蚧輪枝菌菌絲生長的抑制率不同，其中殺真菌劑一代森錳鋅的抑菌作用強，抑菌率高達(dá)100%;其次為殺真菌劑一代森鋅和百菌清及有機磷殺蟲劑一敵敵畏,抑菌率在50%以上;再次為殺蟲劑一氯氰菊酯和阿維菌素;殺細(xì)菌劑一鏈霉素和殺蟲劑一氟蟲腈腈的抑菌率最低，分別為11.6%和13.39%。
表4農(nóng)藥對蠟蚧蚧輪枝菌菌落生長的影響
同列數(shù)據(jù)后具有不同大小寫字母者表示在0.01和0.05水平有顯著差異。
3討論
本文結(jié)果表明,馬鈴薯葡萄糖和查氏培養(yǎng)基最適合蠟蚧蚧輪枝菌生長和產(chǎn)生分生孢子,這與李國霞等的結(jié)果基本相同。關(guān)于化學(xué)農(nóng)藥對昆蟲病原真菌的影響,許多學(xué)者認(rèn)為殺真菌劑比殺蟲劑和除草劑更大，是因為殺真菌劑能直接作用于真菌。本試驗主要研究了幾種農(nóng)藥在常規(guī)濃度下對蠟蚧蚧輪枝菌的抑制作用,總趨勢以殺蟲劑對蠟蚧蚧輪枝菌的抑菌率要小于殺真菌劑,不過也有例外,比如敵敵畏的抑菌率達(dá)58.04%，和殺真菌劑具有同樣大的抑菌作用。這與李振等人的研究結(jié)果相似一有機磷農(nóng)藥的抑制作用較強。由于代森錳鋅、百菌清、代森鋅等殺真菌劑的抑菌作用較強，因此，在溫室蠟蚧蚧輪枝菌流行期間不提倡使用殺真菌劑。
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