Y群腦膜炎奈瑟菌對13種抗菌藥物敏感性試驗——結果
2結果
2.1病例基本情況
病例1于2022年5月25日18時在操場活動后，出現發熱、乏力，未在意。19時出現神志淡漠，尚能對答，21時被同學送到當地醫院發熱門診就診，體溫40.3℃，行血常規、肺部CT檢查，肺部CT提示雙肺散在炎癥，給予地塞米松及氨林巴比妥等對癥處理，病例體溫降至39.0℃。5月26日4時體溫39.9℃，神清，雙下肢輕度水腫，雙肺呼吸音粗，未聞及濕啰音。7時左右出現全身皮膚黏膜散在瘀斑，隨后皮膚黏膜瘀斑較前增多、擴大，8時左右病例出現意識障礙，表現為煩躁不安、對答不切題，病情危重。5月26日9時因病例病情加重轉診至當地三甲醫院ICU救治，入院查體不配合，病例意識模糊、煩躁不安，全身散在皮疹、出血點及瘀斑，雙側瞳孔2.0 mm，等大等圓，對光反射靈敏，雙肺呼吸音粗，可聞及少許干、濕啰音，四肢肌力檢查不配合，大小便失禁。后經搶救無效死亡。5月26日采集患者全血標本。5月27日早上流行病學調查人員采集了與患者有密切接觸的同學、老師、親友的咽拭子共80份，其中男56人，女24人，年齡18~63歲。
病例2，男，15歲，輟學，無業人員。2022年5月9日發病，意識障礙，呼之不應，伴發熱，最高體溫39.2℃，頭痛，惡心，嘔吐。5月9日就診龍華區某醫院，后經治療好轉出院。5月27日采集患者血液培養瓶。6月2日采集密切接觸者57份咽拭子，其中男12人，女45人，年齡22~59歲。
2.2病原學檢測
病例1和病例2的分離株氧化酶陽性，NH鑒定卡顯示為Nm。病例1的80份密接樣本有17份22株氧化酶陽性，經普通PCR鑒定，有5份擴增出的片段清晰符合crgA基因（230 bp）和sodC基因（282 bp）片段長度，鑒定為腦膜炎奈瑟菌，見圖1。病例2的57份密接樣本未檢出腦膜炎奈瑟菌。
圖1 17份病例1密接樣本分離株crgA基因和sodC基因PCR擴增電泳結果
病例分離株和咽拭子Nm分離株共7株Nm，在血平板上呈灰白、圓形、光滑凸起、濕潤不溶血。血清學玻片凝集試驗均為Y群腦膜炎奈瑟菌，見表1。熒光PCR檢測結果顯示，7株Nm的ctrA基因和sodC基因均陽性，Y群Nm特異性基因片段均陽性，其余A、B、C、W、X群Nm特異性基因片段陰性。病例1密切接觸者Y群Nm攜帶率為6.25%（5/80）。
表1病例和密切接觸者腦膜炎奈瑟菌檢測結果和基因組信息
注：5例密切接觸者均為病例1的。
2.3全基因組測序
7株Y群Nm分離株的基因組和GC含量見表1。將拼接好的全基因組序列上傳到國際PubMLST數據庫進行比對，7株Nm序列型均為ST-1655，屬于ST-23克隆群（ST-23 clonal complex,CC23）。7株Nm的耐藥相關基因序列完全相同，喹諾酮耐藥相關基因gyrA等位基因號為1、青霉素耐藥相關基因penA為22，利福平耐藥相關基因rpoB為34，與pubMLST數據庫中大部分ST-1655菌株的等位基因號相同。根據數據庫統計，具有這幾個等位基因序列的大部分菌株對相應抗菌藥物敏感。7株Nm抗原蛋白的氨基酸型別完全相同，H因子結合蛋白（factor H binding protein，fHbp）為v2.25，奈瑟菌肝素結合蛋白A（Neisserian heparin-binding antigen，NHBA）為7，所有菌株不含有奈瑟菌黏附蛋白A（Neisseria adhesin A，NadA）。外膜蛋白基因porA、porB、fetA基因分型結果一致，其中porA VR1為5-1型（變異位點為1），porA VR2為10-1型（變異位點為1），porB為3-117型，fetA為F4-1型。菌株基因亞型為Y：P1.5-1，10-1：F4-1：ST1655（CC23）。這些基因分布和序列特征與pubMLST數據庫中大部分ST-1655菌株相同。
2.4藥物敏感性試驗
7株Y群Nm分離株對青霉素、氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢曲松、美羅培南、氯霉素、阿奇霉素、米諾環素、利福平、環丙沙星、萘啶酸、左氧氟沙星12種抗菌藥物敏感，對復方新諾明耐藥，見表2。
表2 7株Y群腦膜炎奈瑟菌對13種抗菌藥物的最低抑菌濃度μg/mL
Y群腦膜炎奈瑟菌對13種抗菌藥物敏感性試驗——摘要、材料與方法
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