不同濃度巴西蘇木素對耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌生長及抑制作用（一）
摘要：目的探討蘇木及其活性成分對耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌(CRABA)的殺菌作用及巴西蘇木素與美羅培南聯合抑菌作用。方法收集2020年該院檢驗科微生物室分離的10株CRABA,采用微量肉湯稀釋法測定蘇木萃取液和巴西蘇木素的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC),采用高效液相色譜技術測定蘇木萃取液的主要抑菌組分,采用繪制生長曲線方法觀察巴西蘇木素對CRABA生長的抑制作用,采用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定巴西蘇木素對CRABA分泌蛋白的影響,棋盤法觀察巴西蘇木素與美羅培南聯合應用的抑菌效果。結果蘇木萃取液對10株CRABA的MIC、MBC均為15.63 mg/mL,巴西蘇木素的MIC、MBC均為0.5000 mg/mL;高效液相色譜法和MIC測定得到巴西蘇木素為蘇木萃取液中主要抑菌組分。巴西蘇木素與美羅培南聯用時,巴西蘇木素的MIC值由0.5000 mg/mL降至0.1250 mg/mL,美羅培南的MIC值由0.128 mg/mL降至0.064 mg/mL,FIC指數為0.75。結論蘇木中有效抑菌組分為巴西蘇木素,其機制可能是通過影響細菌蛋白的分泌發揮殺菌作用。
鮑曼不動桿菌是一種需氧非發酵的革蘭陰性桿菌，廣泛存在于自然界及人體皮膚，為臨床常見的條件致病菌。由于其生存能力強，并且存在多種耐藥機制，常常有多重耐藥的特性，而這種多重耐藥鮑曼不動桿菌已成為醫院感染的重要病原菌。碳青霉烯類抗菌藥物曾被認為是抗菌活性最強的內酰胺類抗菌藥物,但隨著此類藥物的廣泛使用，鮑曼不動桿菌的耐藥性日益增強，故臨床對此類細菌面臨無藥可用的窘境。蘇木作為傳統天然中藥，具有廣泛的生物活性。有研究表明，蘇木中成分巴西蘇木素對各類微生物都有抑制作用，但對耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRABA)的抑菌作用國內外鮮有報道，本研究通過體外試驗探究巴西蘇木素對CRABA的抑制作用及其機制，并將巴西蘇木素與美羅培南進行聯合藥敏試驗觀察其抑菌作用，為中藥治療CRABA感染提供參考，現報道如下。
1資料與方法
1.1一般資料
1.1.1菌株來源
收集2020年本院檢驗科微生物室分離的10株CRABA，其中5株來源于重癥監護室，2株來源于急診科，3株來源于其他科室。鮑曼不動桿菌對任何一種碳青霉烯類藥物耐藥判定為CRABA株。質控菌株為：美國模式培養物集存庫(American type culture collection，ATCC)25922大腸埃希菌(Escherichia coli，ECO)；ATCC 25923金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，SAU)。
1.1.2試劑與儀器
蘇木(康美藥業股份有限公司)；蘇木單體：巴西蘇木素，原蘇木素B(成都曼斯特生物科技有限公司)；美羅培南(北京索萊寶科技有限公司)；血平板(江門市凱林貿易有限公司)；肉湯培養基與MH瓊脂平板(廣州市迪景生物科技有限公司)；二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide，DMSO，天津市富宇精細化工有限公司)；DHP-9145A電熱鼓風干燥箱(上海一恒科學儀器有限公司)；全自動微生物生長動態監測儀(丹麥Biosense公司)；uLtiMate 3000型高效液相色譜儀(美國賽默飛世爾科技有限公司)；SPECTROstar Nano全波長酶標儀(德國BMG公司)。
1.2方法
1.2.1藥物敏感試驗
細菌分離培養鑒定及藥物敏感性試驗所有標本均按《全國臨床檢驗操作規程(第4版)》及本實驗室的作業指導書要求進行接種和培養，菌株分離純化后使用丹麥Biosense微生物生長動態監測系統oCelloScope進行菌種鑒定和常規藥物敏感性試驗，按2020年美國臨床實驗室標準化協會(clinical and laboratory standards institute，CLSI)標準進行敏感性判斷。
不同濃度巴西蘇木素對耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌生長及抑制作用（一）
不同濃度巴西蘇木素對耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌生長及抑制作用（二）
不同濃度巴西蘇木素對耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌生長及抑制作用（三）